基于 GB 5009.121—2016 中的高效液 相色谱法的方法原理,优化含蛋白质样品(以酱 油为研究对象)和不含蛋白质样品(以食醋为研 究对象)的 DHA 检测前处理过程,包括提取溶 剂、蛋白沉淀剂、提取温度和净化方式的优化, 获得液相色谱法检测 DHA 的最佳条件。此外, 对获得的优化后的检测方法的检出限、定量限、 线性范围、精密度和正确度进行评价,以保证方 法的准确性和适用性,为食品中 DHA 含量日常 监督检测提供科学依据。Agilent 1260 液相色谱仪(配紫外检测器), 湖南恒诺 3-18R 低温高速离心机,Sartorius BT 224S 电子天平,Mettler Toledo XPR10 电子天平, 上海科导超声 SK7200HP 超声波清洗机,Mettler Toledo FE20 pH 计,上海那艾 NAI-FXCQY-12 固相萃取仪。
食品中 DHA 的提取一般在常温下进行,而 温度影响着提取的效率和回收率,为了确定样品 中 DHA 最佳的提取温度,本研究以 DHA 添加水 平为 25 mg/kg 的食醋和酱油为研究对象,采用不 同温度下超声提取,考察提取温度对 DHA 回收 率的影响。通过对 DHA 检测方法的前处 理条件,包括提取溶剂、蛋白沉淀剂、提取温 度、净化方法等参数进行优化,建立了一种快 速、准确的液相色谱测定食醋和酱油中 DHA 含 量的方法。当以水为提取溶剂,硫酸锌和亚铁氰 化钾(v/v=1∶1)联合使用作为蛋白沉淀剂,在 30 ~ 50 ℃超声提取 20 min,食醋和酱油中 DHA 的回收率和 RSD 最好,回收率和 RSD 分别为 98% ~ 102% 和 0.2% ~ 5%。