夏枯草分析（上海科导超声波清洗器使用）

1 实 验 

1. 1 仪器设备与试剂

夏枯草，哈尔滨信衡中药材有限公司。 数显恒温水浴锅，上海力辰邦西仪器科技有限公司; 数控 超声波清洗器，上海科导超声仪器有限公司; 循环水多用真空泵，邦西仪器科技( 上海) 有限公司; 紫外可见分光光度计，北 京普析通用仪器有限责任公司。 实验所用试剂: 芦丁标准品，上海源叶生物科技有限公 司; 亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠等均为分析纯，无锡市亚泰 联合化工有限公司。

1. 2 标准曲线的绘制及样品总黄酮含量测定

精密量取芦丁标准品 10 mg，用 65% 乙醇定容至 100 mL 容 量瓶中，摇匀，备用。分别精确吸取 0，1. 0，2. 0，4. 0，6. 0 和 8. 0 mL 芦丁标准溶液，依次放入 1 至 6 号 25 mL 容量瓶中， 而后加入 0. 8 mL 5% NaNO2 溶液，摇匀后放置 6 min，加入 0. 8 mL 10% Al( NO3 ) 3 溶液，摇匀后放置 6 min，再加入 10 mL 4% NaOH 溶液，用 65% 乙醇定容至刻度，放置 15 min 后于 510 nm 处测定其吸光度。以芦丁标准溶液的质量浓度( C) 为 横坐标，吸光度( A) 为纵坐标，绘制标准曲线。回归方程为: A = 8. 343C+0. 0122，Ｒ = 0. 9999。

1.3 提取方法的确定

称取夏枯草 2. 0 g，加入40 mL 65% 乙醇，室温下浸渍 2 h， 过滤。共提取 2 次后，合并滤液，定容至 100 mL，备用。称取夏枯草 2. 0 g，加入 40 mL 65% 乙醇，水浴回流 1. 5 h， 过滤。共提取 2 次后，合并滤液，定容至 100 mL，备用。称取夏枯草 2. 0 g，加入 40 mL 65% 乙醇，超声提取 40 min， 过滤。共提取 2 次后，合并滤液，定容至 100 mL，备用。提取率达到最高为 5. 83% ，乙醇体积分数继续提高，夏枯 草总黄酮提取率反而开始逐渐下降。分析其原因可能因为乙醇 浓度过高会溶出较多的脂溶性杂质及亲脂性强的成分，其与总 黄酮竞争乙醇溶剂，间接地减少了总黄酮的溶出量，使得提取 率下降。因此选取最优乙醇体积分数为 55% 。

2 结果与讨论

在提取溶剂同为 65% 乙醇，料液比均为 1∶20 的前提下， 3 种提取方法醇浸渍提取法、醇溶剂回流提取法、超声辅助醇提 取法对夏枯草总黄酮的提取率分别为 4. 22% 、5. 34% 、5. 96% 。 结果表明超声辅助醇提取法对夏枯草总黄酮的提取率最高，因 此继续对该提取方法进行单因素及正交实验优化工艺条件。当乙醇体积分数在 35% ～ 55% 范围内时，夏枯草总黄酮提 取率随着乙醇体积分数的升高而增加，当乙醇体积分数为 55%时，提取率达到最高为 5. 83% ，乙醇体积分数继续提高，夏枯 草总黄酮提取率反而开始逐渐下降。

3 结 论 

综合比较了醇浸渍提取法、醇溶剂回流提取法、超声辅助醇提取法对夏枯草总黄酮提取率的影响，结果表明超声 辅助醇提取法对夏枯草总黄酮的提取率最高，并通过单因素实 验及正交实验优选出该提取法的最佳工艺条件: 乙醇体积分数 为 65% 、提取时间为 20 min、料液比为 1∶20，在此条件下， 夏枯草总黄酮提取率为 7. 01% ，本研究为夏枯草总黄酮的提取 及开发利用提供了理论依据。

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