上海科导SK-2000LH对于氨基酸检测的使用

材料与方法

Waters-2695 高效液相色谱仪(配有 2475 荧光检测器 及色谱工作站, 美国 Waters 公司); EYELA 真空旋转蒸发 仪(日本东京理化器械株式会社); CL-20M 高速冷冻离心 机(湖南赛特湘仪离心机仪器有限公司); SK-1 型快速混匀 器 、 HH-S 数显恒温水浴锅 ( 江苏金坛医疗仪器厂 ); SK-2000LH 超声波清洗器(上海科导超声仪器有限公司); GZX-9140 MBE 电热鼓风干燥箱(上海博迅实业有限公司 医疗设备厂)。磺基水杨酸(分析纯, 北京凯瑞基生物科技有限公司); 乙二胺四乙酸二钠 (ethylene-diamine-tetra-acetate, EDTA)(分析纯, 上海雅吉生物科技有限公司); 盐酸(优级 纯, 上海国药公司); Waters AccQ-Fluor 试剂盒(包括硼酸缓 冲液 I、衍生剂粉 2A、稀释液 2B); 混合氨基酸标准液[含 17 种氨基酸, 分别为天冬氨酸(Asp)、丝氨酸(Ser)、谷氨酸 (Glu)、甘氨酸(Gly)、组氨酸(His)、精氨酸(Arg)、苏氨酸 (Thr)、丙氨酸(Ala)、脯氨酸(Pro)、半胱氨酸(Cys)、酪氨 酸(Tyr)、缬氨酸(Val)、甲硫氨酸(Me)、赖氨酸(Lys)、异亮 氨酸(Ile)、亮氨酸(Leu)、苯丙氨酸(Phe), 美国 Waters 公司]; 乙腈(色谱纯, 美国 Honeywell B&J 公司); 实验用高纯水 (美国 MiliQ 公司)。

结果与分析

配制浓度分别为 0.0125、 0.025 、 0.05、 0.075 、 0.1 μmol/mL 氨基酸混标溶液, 每一标准液按上述方法进 行衍生化处理后取 10 μL 进行测定。所有衍生物均可获得较 好的分离。和田红浓缩汁与原汁中氨基酸种类较 为丰富, 同时氨基酸的组成相同, 但其含量上具有一定差 异。和田红浓缩汁中大部分氨基酸(丝氨酸、谷氨酸、组氨 酸、精氨酸、苏氨酸、丙氨酸、脯氨酸、缬氨酸、甲硫氨 酸、赖氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸)含量远高于原 汁, 随酿造过程的进行, 氨基酸总量也逐渐增加。同时随 着酿造的进行, 天冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸、甲硫氨酸的 含量有所降低。其他氨基酸含量均比原汁高, 其 中天冬氨酸、丝氨酸、组氨酸、精氨酸、苏氨酸、缬氨酸、 异亮氨酸、亮氨酸及苯丙氨酸含量增加显著; 谷氨酸与甲 硫氨酸含量略有增加。

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