测定氨基酸的方法！！！

    氨基酸是构成蛋白质大分子的基础物质。氨基酸分析在生 物化学、临床医学、化工等领域有重要作用。目前高效液相色 谱法为分析氨基酸的重要方法；但是许多氨基酸无紫外吸收， 需要经过衍生化之后才可以测定。常用的衍生化试剂有：水合 茚三酮、邻苯二甲醛、异硫氰酸苯酯（PITC）、2,4- 二硝基氟 苯（DNFB）等。高 速 冷 冻 离 心 机（CL31R， 美 国 Thermo 公 司）， 超 声 波 清 洗 器（SK5200LHC，53KHz/35KHz，上海科导仪器有限公司），pH 计（PB-10，赛 多丽丝中国仪器公司），恒温电热水浴锅（HH.SY11-NI2B， 北京市长风仪器仪表公司），恒温干燥箱（KXH 202-2A，上 海科析实验仪器厂），电子分析天平（感量：0.0001g，称量： 110g，美国 OHAUS Corp 公司），4℃ /-20℃冰箱（BCD-216KDA， 海尔集团），涡旋混合器（XW-80A，江苏海门市其林贝尔仪 器制造有限公司）。

    碱性氨基酸：His 在流动相 pH=5.0 至 pH=6.5 时，峰型相 差不大，保留时间基本一致；Ccp 在流动相 pH 为 6.5 时峰型较 好，分离度较好；Arg 在流动相 pH=6.0 至 pH=7.0 时，峰面积 积分相差不大，峰型较好，分离度较好，虽然在流动相 pH 为 5.5 时峰面积积分最大，但是在流动相 pH=5.0 时，Arg 测不到氨基 酸峰。酸性氨基酸：Asp 的最佳柱温为 32℃；Gly 最佳柱温为 40℃。中性氨基酸：Glu 的最佳柱温为 30℃，GABA 最佳柱温 为 32℃。碱性氨基酸：His 最佳柱温为 35℃，Ccp 最佳柱温为 32℃，Arg 最佳柱温为 32℃。