2020-12-24 09:16
材料与方法
4 对 OSCC 及癌旁组织标本来源于南京医科大 学附属口腔医院口腔颌面外科行口腔肿瘤根治性切 除 手 术 的 患 者,所有患者均签署知情同 意 书。 BALB /c 裸鼠购自北京维通利华实验动物技术有限 公司,人舌鳞癌细胞系 Cal27 购 自 美 国 ATCC。 HSF1、上皮细胞钙粘蛋白( E-cadherin) 、α-SMA、成 纤维 细 胞 活 化 蛋 白 ( fibroblast activation protein, FAP) 和成纤维细胞特异蛋白-1 ( fibroblast-specific protein 1,FSP-1) 抗体均购自美国 Abcam 公司,波形 蛋白( Vimentin) 抗体购自上海碧云天生物技术有限 公司,β 肌动蛋白( β-actin) 抗体、辣根过氧化物酶标 记山羊抗鼠/兔二抗购自美国 Proteintech 公司,高纯总 RNA 快速提取试剂盒购自北京百泰克生物技术有限公司。
结 果
经组织块培养法以及差别酶消化法得到纯化的 OSCC 和癌旁组织成纤维细胞。采用 Western blot 检测了 α-SMA、FAP、FSP-1 等 CAFs 标记物和 HSF1 在两类成纤维细胞中的表达,结果显示: α-SMA 和 FAP 蛋白在 OSCC 成纤维细胞中呈现高表达,而在 癌旁成纤维细胞中基本不表达,FSP-1、HSF1 在OSCC 成纤维细胞中的蛋白表达丰度明显高于癌旁 成纤维细胞。癌细胞因异质性以及遗传特点的不稳定性易发 生突变而产生耐药,造成疗效不佳。而肿瘤微环境 是一个相对稳定的环境,异质性小,靶向肿瘤微环境 的治疗策略具有很大的优势。CAFs 是肿瘤微环 境中的一个重要组成部分,在与癌细胞“交叉对话” ( cross-talk) 促进肿瘤生长和侵袭方面发挥着关键作用。我们的研究揭示了 OSCC 的 CAFs 高表达 HSF1,提示 HSF1 可能在 OSCC 中发挥一定作用。
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