2020-12-10 09:03
材料与方法
称取约 2 g 沉积物样品,加入福尔马林溶液 后于 4 ℃ 暗处保存。根据陈琛等的方法,将样 品稀释 10,000 倍后加入少量曲拉通,用 280 W 超声仪(SK250H, 上海科导超声仪器有限公司) 进行 15 min 超声浴。取 1 mL 处理后的样品加 入 1 mL 20 μg/mL DAPI 染色剂于暗室染色 30 min 后过滤至 0.2 μm 聚碳酸酯膜(Whatman, 英国), 然后,在荧光显微镜(BX51, OLYMPUS)紫外光 下随机选择 10 个视野对蓝色、清晰可见的细胞 进行计数(视野放大 400 倍)。对于 33 站位的柱状沉积物样品,各深度沉 积物间隙水中的硝酸盐、亚硝酸盐、铵盐、磷酸 盐和硅酸盐浓度由 Quaatro 营养盐自动分析仪 (Seal Analytical Ltd., 英国)测定;亚铁离子和锰 离子浓度利用 ICP-AES( Perkin Elmer INC.,美 国)进行测定;硫酸盐浓度使用 ICS-3000 离子色 谱(Diones, 美国)测定。
结果与讨论
G6 站和 33 站分别获得 23 cm 和 50 cm 柱状 样,根据细菌计数和荧光定量 PCR 检测结果、拷 贝数和细胞数之间以及细胞数和生物量之间的 换算关系,可得到 G6 站和 33 站柱状沉积物中总 细菌、AOB 和 DB 生物量随深度的变化情况。33 站中 AOB 和 DB 占微生物总量的比例比 较稳定,而 G6 站中 AOB 和 DB 占总细菌生物量 的比例则在不同深度有很大范围的波动, 说明剧烈混合为 AOB 和 DB 的生存提供了有利 条件,可以在沉积物的较深层次推动氨氧化和反 硝化作用,也就为河口区的硝化和反硝化作用提 供了更加有力的支持。
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