2020-05-06 11:49
1 材料与试剂
1.1 实验动物
ICR 小鼠,雄性,18.0~22.0 g,6月龄。购于长春亿斯实 验动物技术有限公司,许可证号:SCXK(吉)-2015-0001。
1.2 材料
云芝材料采自吉林省延边州汪清县林区,经吉林 农业大学宋慧教授鉴定为多孔菌科彩绒革盖菌 (C.versicolor Quel)的干燥子实体。 云芝浸膏(Coriolus versicolor extract, CVE)由本 实验室提取完成,提取过程为将 700.0 g 云芝清洗干 净,加入 12 倍量的蒸馏水,蒸煮 3.0 h;第 2 次再加入 10 倍量蒸馏水,继续蒸煮 3.0 h。所得浸膏即为试验所 需药物,试验时,用生理盐水将其稀释为所需浓度。
1.3 仪器与设备
TGL-16 K 型离心机(湖南湘仪离心机厂);HH-4 型恒温水浴锅(常州澳华仪器公司);FA 1004 B 型电 子天平、YP 5002 型电子天平(上海越平科学仪器有限 公司);BioTek-Epoch 型酶标仪(美国 BioTek 公司); SK 5200 H型超声波清洗器(上海科导超声仪器有限公司);LEICA EG 1150 H 型包埋机、LEICA RM 2255 型 切片机(德国徕卡公司);KD-T 型摊片机(浙江省科迪 仪器设备有限公司);Coyote-Bio G 200 型组织匀浆破 碎仪(卡尤迪生物科技);OLYMPUS BX 53 型光学显 微镜〔奥林巴斯(中国)有限公司〕。
2 方法
保持动物饲养室温度为 25 ± 2 ℃,自由饮食。隔 日称重,根据体重调整给药量,剂量为10 mL(/ kg·d), 周期 30 d,末次给药后,禁食不禁水 16 h。阴性对照组 灌胃花生油,其余各组均灌胃 1% CCl4 花生油溶液建 立肝损伤模型,剂量为 5 mL/kg,2 h 后解剖。摘眼 球取血待测血清相关指标;脱颈处死,取肝左叶,固定, 待做病理学研究,取肝右叶置于液氮内,待测肝组织相 关指标。
3 讨论与结论
通过观察肝组织病理切片可得模型组肝细胞出现 大量溶解、脱落现象,而研究结果表明,CVE 能改善 CCl4 造成的肝细胞脱落、溶解,以及脂肪变性,这与孙卉等开展的云芝多糖保肝效果所得结论一致。在 前期开展云芝提取物对小鼠酒精肝损伤的保护作用研 究中发现CVE能明显改善肝功能及病理病变。
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