黄酮提取工艺优化(上海科导SK8210LHC使用)

1 实验材料与仪器 

淡竹叶( 购于宜春市神农堂大药房) ，芦丁标准品( 上海源 叶生物科技有限公司) ，亚硝酸钠、硝酸铝( 国药集团化学试剂 有限公司) 、无水乙醇、95% 乙醇、30% H2O2、FeSO4、水杨酸、Tris － Hcl 缓冲液、邻苯三酚( 均购于国药集团化学试剂有限公司) ，DPPH( 阿拉丁试剂有限公司) ，以上试剂均为分析纯。 BS223S 天平( 北京赛多利斯仪器系统有限公司) ; 752N 紫 外可见分光光度计( 上海佑科仪器有限公司) ; SK8210LHC 超声波清洗器( 上海科导超声仪器有限公司) 。 

2 实验方法

采用 NaNO2 － Al( NO3 ) 3 比色法测定黄酮含量，以芦丁为 标准品，并稍作修改。在 510nm 处测得标准曲 线回归方程为: Y = 0． 0095X － 0． 0317，Ｒ2 = 0． 9964。然后测定 黄酮提取液的吸光度，代入标准曲线方程得到待测液中样品浓 度，再根据提取率公式求出淡竹叶黄酮的提取率。配制不同浓度的淡竹叶黄酮溶液，取 1． 0mL 不同质量浓度 的样品溶液于比色管中，分别加入 4mL Tris － Hcl 缓冲液，25℃ 水浴加热 20min，分别加入 0． 3mL 5 mmol /L 邻苯三酚溶液，混 匀，于 420nm 处检测各组吸光值，空白对照组用相同体积的蒸 馏水替代样品。

3 实验结果与讨论

不同浓度的乙醇溶液作溶剂，黄酮提取率 有所不同，乙醇浓度 ＜ 65% 时，黄酮提取率随着乙醇浓度的增 大而升高，乙醇浓度 ＞ 65% 时，黄酮提取率随着乙醇浓度的增 大而降低，由此可以确定乙醇的最佳浓度为 65% 。所用的提取时间不同，竹叶黄酮的提取率 也有所不同，当提取时间处于 5 ～ 25min 区间时，黄酮提取率随 着提取时间的增加而升高; 当提取时间处于 25 ～ 45 区间时，黄 酮提取率随着提取时间的增加而降低，表明 25min 应为最佳提取时间。

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